img

官方微信

高级检索

中国沙漠, 2021, 41(6): 126-137 doi: 10.7522/j.issn.1000-694X.2021.00079

开垦对阿拉尔绿洲盐渍化荒漠土壤微生物群落的影响

王亚妮,1,2, 胡宜刚,1, 王增如1, 李昌盛1,2

1.中国科学院西北生态环境资源研究院 沙坡头沙漠研究试验站,甘肃 兰州 730000

2.中国科学院大学,北京 100049

Impacts of reclamation on salinization desert soil microbial community: a case study of Alar oasis

Wang Yani,1,2, Hu Yigang,1, Wang Zengru1, Li Changsheng1,2

1.Shapotou Desert Research and Experiment Station,Northwest Institute of Eco-Environment and Resources,Chinese Academy of Sciences,Lanzhou 730000,China

2.University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,China

通讯作者: 胡宜刚(E-mail: huyig@lzb.ac.cn

收稿日期: 2021-04-09   修回日期: 2021-06-29  

基金资助: 国家重点研发计划项目.  2017YFC0504301
国家自然科学基金项目.  31971749

Received: 2021-04-09   Revised: 2021-06-29  

作者简介 About authors

王亚妮(1996—),女,甘肃庆阳人,硕士研究生,主要从事土壤微生物生态学研究E-mail:wangyn45@163.com , E-mail:wangyn45@163.com

摘要

近年来,以对天然荒漠进行开垦和耕作为标志的人类活动加速了中国西北干旱荒漠区的绿洲化进程,但这种土地利用方式的改变对干旱荒漠土壤微生物群落特征的影响及其机理尚不清楚。本研究利用qPCR和Illumina Miseq高通量扩增子测序技术对新疆阿拉尔绿洲开垦5年的棉花田(FS)和毗邻的天然荒漠(ND)的土壤细菌、古菌和真菌群落的生物量、多样性和群落结构进行了对比研究,揭示了驱动荒漠土壤微生物群落结构演变的主要因子。结果表明:(1)荒漠开垦为农田后,土壤细菌和真菌群落的生物量显著增加,而古菌群落生物量显著降低;细菌群落多样性明显提高,古菌群落的Shannon多样性指数显著降低,而真菌群落多样性没有显著变化。(2)盐渍化荒漠具有不同于其他干旱荒漠的土壤微生物群落结构,开垦显著改变了其土壤细菌、古菌和真菌的群落结构。其中,放线菌门、绿弯菌门、酸杆菌门、螺旋体菌门和浮霉菌门细菌、乌斯古菌门和芽枝霉门真菌的相对丰度显著增加,而盐纳古菌门的相对丰度则显著降低。(3)土壤电导率(EC)、总有机碳(TOC)、全氮(TN)、全磷(TP)是影响细菌群落结构的关键因子;古菌群落结构的主要影响因子为植被盖度、地上生物量和丰富度、TP和AP;EC是影响真菌群落结构的关键因子。综上所述,盐渍化荒漠开垦后由于其原生植被群落、化学肥料的使用和土壤属性(EC、TP和AP)的改变不同程度地改变了荒漠土壤微生物群落特征。相对而言,细菌群落对土地利用方式的改变响应最为敏感,而古菌和真菌群落的多样性和结构则保持相对稳定。

关键词: 开垦 ; 荒漠 ; 高通量测序 ; 土壤微生物 ; 群落结构

Abstract

Recently, human activities characterized by reclamation and cultivation accelerated oasisization of drylands in the northwest China. However, it is still unclear about how such land use changes impact characteristics of soil microbial communities in saline-alkaline desert. By using qPCR and Illumina Miseq high-throughput amplicon sequencing technologies, we conducted a comparative study on soil fungal, bacterial and archaeal community biomasses, diversities and structures in a 5-year-old cotton farmland soil (FS) and an adjacent natural desert soil (ND) in Alar oasis of Xinjiang province. The results showed that: (1)reclamation significantly increased bacterial and fungal biomasses, and decreased archaeal biomass based on qPCR estimation. While most bacterial diversity indices significantly increased and archaeal Shannon index decreased due to reclamation, fungal diversity indices were not significantly changed. (2) An unique microbial community different from other arid desert ecosystem inhabited in the salinization desert. Reclamation significantly changed soil bacterial, archaeal and fungal community structures. Especially, the relative abundances of Actinobacteria, Chloroflexi, Acdiobacteria, Saccharibacteria and Nitrosipirae bacteria, Woesearchaeota_DHVEG-6 archaea and Blastocladiomycota fungi in FS significantly increased, while that of Nanohaloarchaeota archaea significantly decreased compared to that in ND. Soil electrical conductivity (EC), total organic C(TOC), total N(TN), total P (TP) and available P (AP) were the key factors in determining bacterial community structure, vegetation coverage, aboveground biomass and richness, TP and AP were the key factors in shaping archaeal community structure, and EC was the key factors in structuring fungal community. In conclusion, oasisization due to recalmation divergently shifted characteristics of soil microbial community in salinization desert mainly due to changes in virginal vegetation, soil EC, TOC and TN and chemical fertilizers use, therein bacterial community showed the highest sensitivity to reclamation, while archaeal and fungal diversity and structure were relatively stable.

Keywords: reclamation ; desert ; high-throughput sequencing ; soil microbes ; community structure

PDF (5925KB) 元数据 多维度评价 相关文章 导出 EndNote| Ris| Bibtex  收藏本文

本文引用格式

王亚妮, 胡宜刚, 王增如, 李昌盛. 开垦对阿拉尔绿洲盐渍化荒漠土壤微生物群落的影响. 中国沙漠[J], 2021, 41(6): 126-137 doi:10.7522/j.issn.1000-694X.2021.00079

Wang Yani, Hu Yigang, Wang Zengru, Li Changsheng. Impacts of reclamation on salinization desert soil microbial community: a case study of Alar oasis. Journal of Desert Research[J], 2021, 41(6): 126-137 doi:10.7522/j.issn.1000-694X.2021.00079

0 引言

中国的荒漠生态系统面积约2.61×106 km2,占全国国土面积的27.2%,主要分布在水资源匮乏的北方极端干旱、干旱和半干旱地区1。过去几十年,由于该区域人口的迅速增加和社会、经济发展的需求2-3,中国北方以耕地面积明显增加为主要标志的绿洲化进程加速2-5。1990—2015年,西北干旱区耕地面积以年均8.9万hm2的速度持续增加,新增的耕地主要来自对新疆塔里木盆地、伊犁河谷地区和准噶尔盆地荒漠草地的开垦5。这不仅改变了荒漠原生植被的群落结构,也打破了原有的水热和水盐平衡,导致土壤水分、盐分、养分和物理结构的显著变化6-10,从而彻底地影响了荒漠生态系统的物质循环和能量流动。以南疆的阿拉尔绿洲为例,这一地区处于极端干旱区,年均降水量不足50 mm,灌溉用水完全依赖天然山脉和昆仑山山脉的冰雪融水,水资源非常匮乏。同时,该地区的土壤盐渍化问题十分严重,农业生产中需要大量灌溉来淋洗土壤中的盐分以满足作物生长。近年来,膜下滴灌技术在作物生长季的推广和应用一定程度上缓解了水资源的匮乏,但每年的冬灌和春灌依然需要大量灌溉用水进行土壤盐分的淋洗7。过去30年(1990—2019年)耕地面积持续增长,净增长量为729.97 km2,增长率高达312.2%2。大面积耕地的扩增进一步加剧了塔里木河上游地区本就突出的水土矛盾问题。同时,由于淋洗土壤盐分的灌溉排水导致塔里木河水质的恶化,严重威胁到下游地区的农业生产和生态安全11-12

土壤微生物通过参与元素生物地球化学和多种生态过程调节影响植物生长、土壤肥力和健康以及生态系统的结构和功能13。荒漠土壤微生物群落特征与植被群落(生物量、多样性)和土壤特性(养分水平、盐分、pH值、干旱程度等)密切相关14-15。由于环境对微生物的选择性差异,处于不同生物气候区和不同植被类型的土壤微生物群落特征存在明显的差异15-16。阿拉尔绿洲的荒漠因具有极干旱、夏季高温、盐渍化土壤、低覆盖度和多样性盐生灌木分布的生物气候特点,可能孕育了一些耐极端条件(如耐干旱和耐盐碱)的土壤微生物群落,从而塑造了有别于其他荒漠的土壤微生物群落结构。在荒漠开垦为农田后,由于作物种植、灌溉、施肥等农业活动,植被结构、土壤养分、盐分和水分等诸多方面均发生了显著变化17-18,必然导致土壤微生物群落结构的显著改变19。学者已从耕作方式20-21、施肥制度21-23、灌溉方式24-27等如何影响典型农区土壤微生物群落方面开展了大量研究,但针对干旱区土地利用方式变化如何影响土壤微生物群落的研究相对较少。少数学者采用培养法28-29、变性梯度凝胶电泳法(DGGE)30、磷脂脂肪酸法(PLFA)8、基因测序1731-33、芯片原位杂交30等技术对荒漠及其开垦后土壤细菌或真菌群落生物量、多样性及其结构的变化开展了研究,研究区域主要在盐渍化程度不高的干旱或干旱半干旱区,而针对盐渍化、极干旱荒漠在开垦后土壤微生物群落变化的对比研究较少,有关真菌和古菌群落的研究更为稀缺34,从而限制了我们对荒漠土壤微生物群落如何响应土地利用方式改变的理解和认识。

本文以位于塔里木上游极干旱地区、土壤盐渍化问题非常突出的阿克苏绿洲为例,选择天然荒漠和新垦的农田为研究对象,采用qPCR和Illumina Miseq高通量扩增子测序技术,对比研究天然荒漠在开垦后土壤细菌、古菌和真菌群落生物量、多样性和结构的变化,结合植被和土壤理化特征,剖析开垦对其土壤微生物群落结构的影响程度及其关键因子,旨在为指导该地区的生态安全与保护、土地利用和管理及其农业生产提供基础科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验地概况

试验地位于新疆的阿拉尔绿洲垦区边缘(40°44′09″N、81°08′10″E,海拔974 m)。该区域是阿克苏河、和田河和叶尔羌河交汇之地,属于暖温带极端干旱气候区,区内广泛分布着盐碱型天然荒漠和人工开垦的农田。多年平均气温11.6 ℃,年降水量45.7 mm,降水多在6—10月,年日照2 940 h,年蒸发量超过2 500 mm。土壤为沙质潮土,土壤盐渍化程度高。天然植被以盐生灌木为主,主要优势物种有盐穗木(Halostachys caspica)、柽柳(Tamarix ramosissima)、梭梭(Haloxylon ammodendron)、小果白刺(Nitraria sibirica)等,草本以骆驼刺(Alhagi sparsifolia)、芦苇(Phragmites australis)、胀果甘草(Glyzyrrhiza inflata)和花花柴(Kare-linia caspica)为主35。农田以连续耕作种植棉花为主。

1.2 采样方法

选择新开垦后连续耕作5年的棉田(FS)和相毗邻的天然荒漠(ND)为研究样地。棉花的种植密度约140 000株·hm-2(70 cm行距和10 cm株距),播种时施磷酸二氢铵(750 kg·hm-2)和钾肥(150 kg·hm-2)作为基肥,以尿素进行追肥(80 kg·hm-2)。在棉花生长期(4—9月)采用膜下水肥一体化滴灌方式进行灌溉,生长季灌溉量约为4 200 m3·hm-2,在冬(11月)、春(3月)两季采用漫灌方式进行盐分淋洗,棉花产量为4 500—4 550 kg·hm-2,棉花采收后其秸秆用机械打碎后还田。

2019年8月初,在3块相邻的FS和ND各设置1条150 m的样线,每隔50 m设置1个10 m×10 m的大样方,大样方距离棉田和荒漠边界超过30 m以避免边际效应。调查ND样地10 m×10 m样方内的植被盖度、组成和数量,计算物种丰富度,人工采集植被地上部分。从FS中采集5株棉花标准株,并记录10 m×10 m样方内棉花的行数和列数。植物样品带回实验室内,在80 ℃下连续烘72 h后称重,估算植物地上生物量。

沿每个10 m×10 m 样方的对角线均匀设置3个1 m2(1 m×1 m)的小样方,采集每个1 m2的4个角和样方中心共5个点10 cm内的土壤,3个1 m2小样方的土壤混合为1个土样。采集的土壤样品带回实验室后,人工捡出植物根系等杂物,过2 mm筛后充分混合,并分为3份。一份储存于-20 ℃下,用于DNA的提取、土壤微生物生物量的测定(qPCR)和基因测序(Illumina Miseq)。一份在4 ℃下保存,用于测定土壤含水量和提取无机氮(铵态氮和硝态氮)、可溶性有机碳(DOC)和可溶性有机氮(DON)。剩余土壤样品在室内自然条件下风干,测定其他土壤理化性质指标。

1.3 土壤样品分析

土壤含水量(SWC)用烘干称重法(105 ℃)测定;pH值和电导率(EC)分别采用电位法和电导法(土∶水=1∶2.5)测定;采用Costech元素分析仪(ECS 4010, Valencia, 美国)测定土壤总有机碳(TOC)和全氮(TN);全磷(TP)采用酸溶-钼锑抗比色法测定;土壤有效磷(AP)采用NaHCO3浸提-钼锑抗比色法测定(Olsen and Sommers,1982)。用2 mol·L-1的KCl(土∶水=1∶2.5)提取土壤中的DOC、DON、铵态氮(Nitrate)和硝态氮(Ammonia)36,在TOC/TN分析仪(Vario TOC, Elementar,德国)和连续流分析仪(Skalar San++,荷兰)上进行分析。

1.4 DNA提取和qPCR

利用E.Z.N.A.®(Omega Bio-tek,Norcross,GA,美国)土壤DNA试剂盒提取土壤样品中的总DNA,用1%的琼脂糖凝胶电泳和Nanodrop®ND-2000紫外分光光度计(NanoDrop Technologies,Wilmington,DE,美国)测定260/280 nm 和260/230 nm的吸光值来检测DNA的纯度和浓度。提取的DNA稀释后保存于TE缓冲液中(10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH值8.0),并保存在-20 ℃下备用。

采用StepOne实时荧光PCR仪(ABI 7500,Applied Biosystems,Foster City,CA,美国)测定细菌和古菌16S rRNA以及真菌ITS基因的绝对丰度。细菌的一对扩增引物分别为Eub338(5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3′)和Eub806(5′-GGACTACH- VGGGTWTCTAAT-3′),古菌的正向和反向扩增引物分别为Arch344(5′-ACGGGGYGCAGCAGGCGCGA-3′)和Arch915(5′-GTGCTCCCCCGCCAA-TTCCT-3′),真菌的正向和反向扩增引物分别为ITS1(5′-CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA-3′)和ITS2(5′-TGCGTTCTTCATCGATGC-3′)。每20 μL的q-PCR 反应体系由10 μL 高灵敏性染料法定量PCR检测试剂 (Vazyme Biotech Co.,Ltd,China)、正向和反向引物各0.8 μL(5 μM)、1 μL DNA模板和7.4 μL等离子水组成。扩增条件为95 ℃下预变性5 min,95 ℃下40个循环30 s,细菌在55 °C下退火30 s,古菌和真菌在58 ℃下退火30 s,72 ℃下延伸1 min。所有qPCR均重复3次。引物扩增效率94.2—103.8%(R2>0.999)。标准曲线由含有细菌(Arch)、古菌(ITS)和真菌(Eub)的扩增子引物和一组含有质粒10倍系列的稀释液构建。细菌和古菌16S rRNA以及真菌ITS基因拷贝数由回归方程中的转换拐点(Ct)和已知的标准曲线中的拷贝数计算得到。

1.5 PCR扩增和Illumina MiSeq测序

用与qPCR相同的引物构建细菌、古菌和真菌基因文库。以10 ng DNA样品为模板在GeneAmp® 9700 PCR扩增仪(Applied Biosystems, Foster City, 美国)上扩增细菌和古菌16S rRNA以及真菌ITS基因。20 μL的反应体系包括 4 μL FastPfu Buffer溶液,2 μL 2.5 mM dNTPs,正向和反向引物各0.8 μL(5 μM), 0.4 μL FastPfu 聚合酶、10 ng DNA模板,加等离子水至20 μL。扩增条件如下:95 ℃预变性3 min, 细菌和古菌16S rRNA及真菌ITS基因在95 ℃变性30 s,分别循环29、35次和35次,55 ℃下退火30 s,72 ℃下退火45 s,72 ℃下延伸10 min。PCR产物用2%的琼脂糖凝胶和AxyPrep DNA凝胶试剂盒回收(Axygen Biosciences,Union City,CA,美国) ,用QuantiFluor™-ST微型荧光剂进行定量(Promega Corporation,Madison,美国)。纯化后的PCR产物混合后在Illumina MiSeq高通量测序平台上(Illumina,San Diego,美国)从两端进行测序。测序详细步骤参见上海美吉生物科技有限公司(http://www.majorbio.com)发布的操作规程。原始测序数据上传到NCBI SRA数据库,登录号为SRP313589。

1.6 数据处理与分析

采用SPSS 22.0 Shapiro-WilkH检验植被和土壤属性数据的正态性,用T检验分析FS和ND之间植被、土壤属性、微生物生物量、α多样性和群落相对丰度的显著性差异。高通量测序数据用FLASH、Trimmomatic软件进行去杂和质控过滤,获得优化序列。用UPARSE软件(7.1版,http://drive5.com/uparse/)对有效序列以97%的序列相似度进行聚类分析生成操作分类单位(OTUs)。通过BLAST软件与NCBI GenBank数据库进行比对分类。采用R语言(V3.4.3)分析Illumina MiSeq测序数据。随机选择OTU表计算OTUs (Richness)、Chao1、Shannon、Simpson和系统发育指数(PD)以及不同采样点之间的Bray-Curtis距离差异。采用非度量多维尺度法分析(NMDS)可视化样本OTU之间的Bray-Curtis距离,以判定不同样地之间微生物群落结构的相似性,组间差异采用ANOSIM进行检验。采用基于unweighted_unifrac距离的Mantel test和Spearman相关分析法分析细菌群落结构与植被和土壤属性之间的相关性。

2 结果与分析

2.1 植被群落和土壤属性

FS的植被盖度、地上生物量显著高于ND,而P_richness和土壤EC则恰好相反。FS土壤的TP和AP显著高于ND土壤,其他土壤指标与ND没有显著差异(表1),表明开垦显著增加了ND的植被生物量,降低了其物种丰富度、EC和磷的有效性。

表1   农田和荒漠植被群落特征和土壤属性

Table 1  Vegetation community and soil properties of farmland and desert

指标棉田FS荒漠ND
植被盖度/%97.3(0.7)a46.7(4.4)b
地上生物量/(g·m-21973.2(99.1)a392.8(83.0)b
物种丰富度1(0)b3(0)a
pH值8.2(0.2)8.1(0.1)
电导率/(μS·cm-118.3(2.2)b819.3(134.1)a
土壤含水率/%13.0(2.1)10.5(1.6)
土壤总有机碳/%2.1(0.07)2.0(0.02)
土壤全氮/%0.02(0.001)0.03(0.001)
土壤全磷/%0.9(0.02)a0.8(0.01)b
土壤有效磷/(g·kg-125.6(4.03)a2.0(0.90)b
土壤速效钾/(mg·kg-1157.0(12.5)177.7(9.8)
可溶性有机碳/(mg·kg-111.2(3.2)4.4(1.4)
可溶性有机氮/(mg·kg-123.8(5.6)80.6(39.8)
硝态氮/(mg·kg-18.8(3.6)8.1(2.0)
氨态氮/(mg·kg-10.1(0.01)0.1(0.03)

不同字母表示两个样地之间差异显著(P<0.05),括弧内数字为标准差。

新窗口打开| 下载CSV


2.2 微生物生物量和多样性

qPCR结果显示,FS土壤细菌和真菌群落的基因拷贝数显著高于ND土壤。相反,其古菌群落的基因拷贝数则显著低于ND(图1),说明荒漠开垦为农田显著增加了土壤细菌和真菌群落的生物量,而降低了古菌群落的生物量。

图1

图1   不同土壤微生物类群基因丰度

**和*分别表示不同样地在P<0.05和P<0.1水平上的差异显著性

Fig.1   The gene abundances (copies·g-1 soil) of different soil microbial communities


FS土壤细菌的Richness、Shannon、Ace、Chao1和PD多样性指数均显著高于ND土壤,其古菌群落Shannon指数却显著低于ND土壤;ND和FS之间的土壤真菌群落的所有物种多样性指数均没有显著差异(表2)。

表2   土壤微生物类群多样性指数

Table 2  The diversity index of soil microbial communities

指数细菌古菌真菌
荒漠ND棉田FS荒漠ND棉田FS荒漠ND棉田FS
Richness345(176)b1331(46)a448(46)462(65)830(265)664(50)
Shannon2.1(1.0)b5.5(0.05)a4.8(0.1)a3.8(0.2)b5.1(0.5)3.7(0.5)
Simpson0.4(0.2)0.02(0.01)0.02(0.01)0.11(0.03)0.03(0.02)0.1(0.06)
Ace392.6(193.6)b1527.1(35.3)a463.8(51.2)506.0(56.4)879.5(271.9)711.2(29.6)
Chao1385.0(193.7)b1518.6(30.2)a467.1(51.3)507.8(55.4)880.0(275.4)717.0(24.3)
PD41.2(13.4)b112.6(3.5)a21.1(2.7)48.7(11.8)219.5(89.7)138.2(8.7)

不同字母代表不同样地在P<0.05水平上的差异显著性,括弧内数字为标准差。

新窗口打开| 下载CSV


2.3 微生物群落结构

ND和FS土壤总共发现2 181、1 101、2 636个细菌、古菌和真菌OUT,分属于41个细菌门和611个细菌属、7个古菌门和64个古菌属以及14个真菌门和573个真菌属。其中,ND和FS共有418、261个和379个细菌、古菌和真菌OUT(图23)。NMDS分析结果发现,ND和FS土壤细菌、真菌和古菌群落结构在空间上明显相互分离,表明开垦导致的土地利用方式的改变引起了荒漠土壤微生物群落结构的显著变化。变形菌门(Proteobacteria)是荒漠(74.9%)和农田(38.4%)土壤细菌中的优势菌群;芽单孢菌门(Gemmatimondetes)和放线菌门(Actinobacteria)分别是ND(13.1%)和FS(26.0%)中的次优势细菌(图2G)。广古菌门(Euryarchaeota)古菌在ND(97.0%)和FS(57.5%)土壤中占绝对优势,FS土壤次优势古菌为奇古菌门(Thaumarchaeota),(32.5%);子囊菌门(Ascomycota)是DS和FS共有优势真菌,分别占ND和FS的45.4%和85.9%,未分类真菌门(unclasified_k_Fungi)在ND土壤真菌群落中的占比也很高(42.4%)。

图2

图2   土壤微生物OUT水平Venn图、NMDS分析和门水平相对丰度

细菌:A、D、G;古菌:B、E、H;真菌:C、F、I

Fig.2   Venn plot and NMDS at the OUT level and relative abundance at the phylum level of different soil microbial communities (Bacteria: A, D and G; Archaea: B, E and H; Fungi: C, F and I)


图3

图3   土壤微生物门水平上的相对丰度差异

Fig.3   Differences of relative abundance for soil microbial communities at the phylum level


在门水平上,与ND土壤相比,FS土壤的放线菌门(Actinobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi)、酸杆菌门(Acdiobacteria)、螺旋体菌门(Saccharibacteria)和浮霉菌门(Planctomycetes)细菌、乌斯古菌门(Woesearchaeota_DHVEG-6)古菌和芽枝霉门(Blastocladiomycota)真菌的相对丰度显著增加,而盐纳古菌门(Nanohaloarchaeota)的相对丰度则显著降低(图3)。在属水平上,FS土壤中假节杆菌属(Pseudarthrobacter)、剑菌属(Ensifer)、鞘脂单胞菌属(Sphingopyxis)、Zeaxanthinibacter和其他6个未分类的细菌属的相对丰度显著高于ND土壤(图4);盐微菌属(Halomicrobium)和两个未分类的盐杆菌科(Halobacteriaceae)古菌在ND土壤中的相对丰度显著高于FS土壤,而Candidatus Nitrososphaera古菌的相对丰度则显著低于FS土壤;绿僵菌属(Metarhizium)、亚隔孢壳属(Didymella)和红菇属(Russula)真菌在FS中明显富集。

图4

图4   优势土壤微生物属水平上的相对丰度差异

Fig.4   Differences of relative abundance for soil microbial communities at the genus level


表3所示,土壤细菌群落结构与土壤TOC、TN和TP显著正相关,与EC显著负相关,与ABs和AP呈近显著正相关(P=0.06);古菌群落结构与Coverage、ABs、P_richness、土壤TP和AP显著正相关;真菌群落结构则仅与土壤EC显著负相关,与P_richness近显著正相关(P=0.055)。不同微生物门水平相对丰度与植被群落特征和土壤属性的相关性强弱关系因微生物类群的不同而异(图5),大多数细菌门与植被Coverage、ABs、TOC、TP和AP显著负相关,而与P_richness显著正相关。广古菌门(Euryarchaeota)和奇古菌门(Thaumarchaeota)的相对丰度与植被和土壤属性之间的相关关系基本相反。

表3   土壤微生物群落与植被和土壤属性的Mantel tests分析

Table 3  Mantel tests for correlations of soil microbial communities with vegetation and soil properties

指标细菌古菌真菌
rPrPrP
植被盖度0.4810.0750.8710.0040.3750.098
地上生物量0.4460.0570.8070.0110.3520.067
物种丰富度0.6530.0920.7800.0440.5500.055
pH值0.0200.9850.1360.7260.4240.088
电导率-0.6960.0010.7120.114-0.5450.039
土壤含水率0.1510.6610.0400.879-0.2370.604
土壤总有机碳0.7730.0030.1840.3830.2690.445
土壤全氮0.7140.018-0.1610.4100.2240.550
土壤全磷0.6310.0100.5680.0450.5080.060
土壤有效磷0.3610.0620.8080.0210.2130.299
土壤速效钾0.0370.8930.3270.2160.1620.541
可溶性有机碳0.0080.983-0.0070.9890.0280.970
可溶性有机氮-0.2330.3330.2300.347-0.2110.549
硝态氮0.4540.089-0.2340.222-0.0500.930
氨态氮-0.2550.5360.0950.612-0.2190.540

新窗口打开| 下载CSV


图5

图5   土壤微生物群落门水平相对丰度与植被和土壤属性相关性

*,0.01<P≤0.05; **,0.001<P≤0.01; ***,P≤0.001

Fig.5   Correlations of relative abundance of soil microbial communities at the phylum level with vegetation and soil properties


3 讨论

3.1 开垦与土壤和植被属性

天然荒漠开垦为农田后,作物代替了以盐生型灌木为优势种的原生植被,由于耕作、施肥、灌溉和田间管理等因素,导致农田植被盖度和地上生物量显著提高,而植物丰富度则显著下降。与此同时,开垦后土壤理化属性理应也有明显的变化。通常情况下,干旱荒漠在长期耕作(>10年)后,由于植被残体的输入和肥料的使用,表层土壤TOC和TN等养分显著增加,pH值显著下降817-19,而EC显著下降1930或增加17。本研究发现,荒漠土壤在连续耕作5年后其EC显著下降,TP和AP显著升高,pH值、TOC和TN及其他C、N组分均没有显著变化(表1)。这一结果与上述研究报道不太一致,说明开垦对荒漠土壤属性的影响与其所处的生物气候区、灌溉方式、土壤背景、耕作历史等因素密切相关,短期的耕作对极干旱、盐渍化荒漠植被的影响比土壤属性更为明显,对土壤C、N的累积及其有效性和酸碱度影响不大。可能的原因是,阿拉尔绿洲土壤盐分本底值很高,通常分别在冬季和春季采用大水漫灌方式进行盐分的淋洗,在作物生长季以滴灌方式进行灌溉。5年的耕作历史虽短暂,但由于持续的盐分淋洗后表层土壤盐分含量显著降低,导致土壤EC明显下降。值得注意的是,尽管在棉花生产中有N肥的使用和棉花采收后秸秆还田理论上应该会促进土壤TOC和TN水平提升,但本文却发现开垦5年后土壤中TOC和TN及其组分并无显著变化。北疆荒漠开垦为棉田初期(3—5年)土壤TOC和TN的变化也有类似报道,其TOC含量在开垦后的3—5年内甚至降低8。其可能的原因如下:①开垦初期由于土壤盐分含量高,棉花的地上生物量较低,通过秸秆转化为土壤TOC和TN的数量相对有限,说明开垦后短期的农业耕作还不足以导致该区域土壤C、N等养分含量的显著提升。②大水漫灌导致土壤中的一些可溶性C、N等养分随排水而流失,也很可能导致C、N等养分沿土壤剖面重新分配,导致表层土壤的TOC和TN与天然荒漠无显著差异。③农事耕作和秸秆还田刺激了土壤呼吸,增加了土壤C的排放37;而灌溉导致农田土壤水分高于荒漠土壤,有利于反硝化作用而导致N素以N2O等气体的形式释放到大气中38。但是,磷肥的使用还是导致了土壤中TP和AP成分显著富集,从而增加了P的有效性。

3.2 开垦与微生物生物量及其多样性

一般来讲,土壤水分可利用性和养分水平(如TOC)制约着干旱区土壤微生物群落的生长与繁殖1539-40。许多研究发现,土壤细菌和真菌群落生物量与植被盖度和生物量、土壤TOC和TN含量显著正相关40-41。本研究中,荒漠开垦为农田后其土壤细菌和真菌群落的生物量明显增加,这一研究结果与其他研究报道相一致81732。主要因为天然荒漠开垦后,绿洲农田植被盖度和生物量显著增加(表1),再加上定期的灌溉,其土壤水热条件得到了极大改善,盐渍化程度大大降低,土壤水分有效性明显增强;同时,农田作物地下根系更为密集,大量的植物残体(秸秆还田)、根系残留物和分泌物输入土壤中,为细菌和真菌群落的生长与繁殖提供了大量的底物。另外,虽然荒漠开垦为农田后,其土壤TN无显著变化,但N和P肥的使用无疑会提高土壤养分的有效性,有利于作物地上和地下生物量的积累,进而促进了细菌和真菌生物量的增加。再者,耕种也增加了表层土壤中的氧气含量,为一些好气型微生物的生理代谢活动创造了更优越的环境。因而,农田土壤细菌和真菌群落生物量明显高于荒漠土壤8。但是,本研究无法区分耕作、施肥和灌溉对土壤微生物群落特征的各自作用及其机理,有关这方面的研究还需要开展相关的野外控制试验进行深入研究。

一些原本适应荒漠环境的细菌和真菌群落丰度在开垦为农田后降低或消失32,或被更能适应农田环境的微生物群落所替代33。正如我们的预期,荒漠开垦为农田后土壤细菌群落的多样性显著提升,这一结果与之前的研究报道相一致81732-33。本文的研究也支持了荒漠土壤细菌和古菌群落多样性随着盐分的增加而降低的研究报道14,由于高盐分的积累提高了细胞外的渗透压,使许多土壤微生物难以适应渗透压胁迫而被迫死亡或休眠42-43。然而,开垦对荒漠土壤微生物群落的影响因微生物群落的不同而异,荒漠开垦为农田后将有助于提高土壤细菌和真菌群落的生物量,丰富土壤细菌的群落结构。古菌因其具有嗜热、嗜酸碱和嗜盐的特性,往往能适应荒漠干旱、高温、盐渍化的贫营养性环境44-45,荒漠开垦为农田后因其适宜生境的改变可能导致一些古菌群落的消失或休眠,从而导致其生物量和Shannon多样性的下降。但是,开垦后土壤真菌群落多样性没有明显变化,这一结果与之前的一些研究报道并不一致81733。由此可见,盐渍化荒漠土壤细菌群落的生物量和多样性响应土壤利用方式的改变可能比真菌和古菌群落更快、更敏感。

3.3 开垦与微生物群落结构

本研究发现,荒漠土壤中变形菌门细菌占绝对优势,其相对丰度(74.8%)远高于其他报道(15.0%—40.0%),放线菌门的相对丰度(0.4%)则远低于其他荒漠地区的报道(23%—-52.0%)14-15173146-47;厚壁菌门(Firmicutes)细菌也是干旱荒漠中常见的土壤优势细菌,在非洲的Namib沙漠和中国西部戈壁沙漠土壤中的相对丰度高达50%48和80%47,远远高于本研究中的发现(1.5%);芽单孢菌门细菌的相对丰度(13.1%)明显高于腾格里沙漠土壤(<3.0%)17。与其他研究类似1517,子囊菌门真菌是荒漠土壤中的优势真菌,本研究也发现一些其他未分类真菌门在天然荒漠中也占有较高的相对丰度(图2)。本研究中荒漠土壤广古菌门古菌的相对丰度(97.0%)远高于北非的Tataouine 沙漠土壤(40.0%)45。在Atacama 荒漠、Negev沙漠和内蒙古荒漠草原,土壤真菌群落以曲霉菌属(Aspergillus)和青霉菌属(Penicillium)为主49-51,而本研究中未分类的真菌属在荒漠土壤真菌群落中占绝对优势(图5C)。此外,荒漠土壤中还发现了一些未分类的微生物属(图5),有关这些特殊微生物分类方面的研究还需要进一步加强。可见,盐渍化、极干旱的荒漠环境孕育了有别于其他干旱地区的土壤微生物群落结构。

本研究中的农田开垦时间仅仅只有短短的5年,但开垦仍然导致土壤微生物群落结构的明显变化,反映出荒漠土壤微生物群落结构对土地利用方式变化的快速响应8。整体而言,土壤微生物群落结构与植被属性(盖度、生物量和多样性)、土壤EC、TN、TOC、TP和AP显著相关(表3),其强弱关系因微生物类群的不同而异(图5),可能主要由微生物群落的生物学特性所决定。微生物营养假设认为,农业耕作中由于肥料的使用、根系生物量和分泌物等底物的增加,可能会促使一些富营养型微生物相对丰度的增加,而一些贫营养型微生物的丰度降低3052。但是,本研究的结果并不支持这一假设。例如,变形菌门和放线菌门往往被认为是富营养型细菌,而酸杆菌门和硝化螺旋菌门(Nitrospirae)则为贫营养型细菌。而此研究中放线菌门、酸杆菌门和硝化螺旋菌门细菌的相对丰度在农田土壤中都显著提高(图3A),这一结果也表明还有其他因素比养分水平在更大程度上决定着因土地利用方式而导致的土壤微生物群落结构的变化,有关这方面的机理还需要进一步的深入研究。同时,最新的一项研究发现,盐分是荒漠土壤细菌和古菌群落结构的关键影响因子,一些耐盐性的细菌和古菌群落存在于盐渍化的荒漠土壤中14。因此,荒漠在开垦为农田后由于土壤EC的显著减弱,一些耐盐型的微生物,如γ变形菌门(Gammaproteobacteria)细菌和盐杆菌门(Halobacteria)古菌的相对丰度也随之降低。此外,区域尺度1553和控制试验54方面的研究发现,水分是影响荒漠土壤微生物群落结构的关键因子。然而,本研究中荒漠和农田土壤的水分没有显著性差异,Mantel test结果也发现土壤水分与微生物群落结构并不相关,表明该区域短期的开垦过程中土壤水分对土壤微生物群落结构的直接作用并不明显,主要是通过影响植被盖度、生物量和土壤EC间接影响土壤微生物的群落构建1534。尽管Mantel test分析结果显示土壤TOC和TN仅与细菌群落结构显著正相关,而与古菌和真菌群落结构并不相关(表3),棉田和荒漠土壤之间的TOC和TN也无显著差异(表1),但长期耕作后势必会导致土壤TOC和TN的进一步显著增加8。众多研究1721-2327表明长期的施肥和耕作显著改变了土壤微生物群落结构,由此可以预见荒漠农田土壤微生物群落结构可能也势必会进一步发生变化,但由于缺少连续多年的土壤水分、施肥制度和土壤微生物群落变化的相关数据,还无法建立土壤水分动态、施肥制度与土壤微生物群落结构之间的关系。因此,急需通过开展长时间序列的连续动态监测试验进行荒漠土壤微生物群落演替过程及其作用机理方面的研究。

4 结论

极干旱、盐渍化荒漠因其不同于其他非盐渍化、干旱和干旱半干旱荒漠的自然环境,形成了不同于其他荒漠地区的土壤微生物群落结构。短期的开垦通过改变植被的盖度、生物量和多样性、土壤盐分、土壤P含量及其有效性影响土壤的细菌、古菌和真菌的微生物群落特征。荒漠开垦为农田后,土壤微生物生物量、多样性和群落结构发生了不同程度的改变。其中,土壤细菌、古菌和真菌群落的生物量有不同程度的增加,细菌群落多样性显著提升,古菌群落Shannon多样性指数显著下降,而真菌群落多样性没有显著变化;农田土壤中放线菌门、绿弯菌门、酸杆菌门、螺旋体菌门和浮霉菌门细菌,乌斯古菌门古菌和芽枝霉门真菌的相对丰度显著增加,而盐纳古菌门的相对丰度则显著降低。因此,短期内盐渍化荒漠土壤细菌群落比古菌和真菌群落对土地利用方式变化的响应相对更为敏感。

参考文献

王守华王业伟王业锦.

浅析中国土地荒漠化生态治理现状、存在问题及对策

[C]//中国治沙暨沙业学会,中国林业教育学会.《联合国防治荒漠化公约》第十三次缔约大会“防沙治沙与精准扶贫”边会论文集.20174-12.

[本文引用: 1]

宋奇冯春晖高琪.

阿拉尔垦区近三十年耕地变化及其驱动因子分析

[J].国土资源遥感,2021332):202-212.

[本文引用: 3]

王鸣雷史文娇.

中国北方新增耕地的时空变化及驱动因素分区

[J].中国农业科学,20205312):2435-2449.

[本文引用: 1]

韩云环马柱国李明星.

2001~2010年中国区域土地利用/覆盖变化对陆面过程影响的模拟研究

[J].气候与环境研究,2021261):75-90.

程维明高晓雨马廷.

基于地貌分区的1990-2015年中国耕地时空特征变化分析

[J].地理学报,2018739):1613-1629.

[本文引用: 2]

罗毅.

干旱区绿洲滴灌对土壤盐碱化的长期影响

[J].中国科学:地球科学,2014448):1679-1688.

[本文引用: 1]

席琳乔马丽亚王栋.

灌溉方式对荒漠绿洲过渡带地下水与土壤理化性质的影响

[J].塔里木大学学报,2020321):62-70.

[本文引用: 1]

王银亚李晨华马健.

开垦对荒漠土壤微生物群落结构特征的影响

[J].中国沙漠,2017373):514-522.

[本文引用: 9]

柳菲陈沛源于海超.

民勤绿洲不同土地利用类型下土壤水盐的空间分布特征分析

[J].干旱区地理,2020432):406-414.

陈小兵杨劲松刘春卿.

新疆阿拉尔灌区土壤次生盐碱化防治及其相关问题研究

[J].干旱区资源与环境,2007216):168-172.

[本文引用: 1]

韩桂红吐尔逊·哈斯木石丽.

塔里木河下游土地沙漠化及其原因探讨

[J].中国沙漠,20082):217-222.

[本文引用: 1]

郭宏伟徐海量凌红波.

塔里木河下游耕地扩张与天然植被退化的定量关系初探

[J].干旱地区农业研究,2018362):226-233.

[本文引用: 1]

Schloter MNannipieri PSorensen S Jet al.

Microbial indicators for soil quality

[J].Biology and Fertility of Soils,2018541):1-10.

[本文引用: 1]

Zhang KShi YCui Xet al.

Salinity Is a key determinant for soil microbial communities in a desert ecosystem

[J].Msystems,201941):1-11.

[本文引用: 4]

Maestre F TDelgado-Baquerizo MJeffries T Cet al.

Increasing aridity reduces soil microbial diversity and abundance in global drylands

[J].Proceedings of the National Academy of Sciences,201511251):15684-15689.

[本文引用: 7]

Delgado-Baquerizo MOliverio A MBrewer T Eet al.

A global atlas of the dominant bacteria found in soil

[J].Science,20183596373):320-325.

[本文引用: 1]

Wang Z RLiu Y BZhao L Net al.

Change of soil microbial community under long-term fertilization in a reclaimed sandy agricultural ecosystem

[J].Peerj,201971-21.

[本文引用: 11]

李易麟南忠仁.

开垦对西北干旱区荒漠土壤养分含量及主要性质的影响:以甘肃省临泽县为例

[J].干旱区资源与环境,20082210):147-151.

[本文引用: 1]

Li C HTang L SJia Z Jet al.

Profile changes in the soil microbial community when desert becomes oasis

[J].PloS One,20151010):1-15.

[本文引用: 3]

Huang MJiang L GZou Y Bet al.

Changes in soil microbial properties with no-tillage in Chinese cropping systems

[J].Biology and Fertility of Soils,2013494):373-377.

[本文引用: 1]

Fan XJin KLi Zet al.

Soil microbial diversity under different fertilization and tillage practices:a review

[J].Plant Nutrition and Fertitizer Science,2010163):744-751.

[本文引用: 3]

Zhang Q PMiao F HWang Z Net al.

Effects of long-term fertilization management practices on soil microbial biomass in China's cropland:a meta-analysis

[J].Agronomy Journal,20171094):1183-1195.

Xu YYu WMa Qet al.

Assessment of the impact of different fertilization systems on soil microbial ecology

[J].Journal of Soil Science,2010415):1262-1269.

[本文引用: 2]

Zhang Y LDai J LWang R Qet al.

Effects of long-term sewage irrigation on agricultural soil microbial structural and functional characterizations in Shandong,China

[J].European Journal of Soil Biology,2008441):84-91.

[本文引用: 1]

Bastida FTorres I FRomero-Trigueros Cet al.

Combined effects of reduced irrigation and water quality on the soil microbial community of a citrus orchard under semi-arid conditions

[J].Soil Biology & Biochemistry,2017104226-237.

Ibekwe A MGonzalez-Rubio ASuarez D L.

Impact of treated wastewater for irrigation on soil microbial communities

[J].Science of the Total Environment,20186221603-1610.

Li Y JChen XShamsi I Het al.

Effects of irrigation patterns and nitrogen fertilization on rice yield and microbial community structure in paddy soil

[J].Pedosphere,2012225):661-672.

[本文引用: 2]

李晨华李彦谢静霞.

荒漠-绿洲土壤微生物群落组成与其活性对比

[J].生态学报,2007278):3391-3399.

[本文引用: 1]

张威章高森刘光琇.

腾格里沙漠东南缘可培养微生物群落数量与结构特征

[J].生态学报,20122):567-577.

[本文引用: 1]

Ding G CPiceno Y MHeuer Het al.

Changes of soil bacterial diversity as a consequence of agricultural land use in a semi-arid ecosystem

[J].PLoS One,201383):1-10.

[本文引用: 4]

Li CTang LJia Zet al.

Profile changes in the soil microbial community when desert becomes oasis

[J].PLoS One,20151010):1-15.

[本文引用: 2]

Köberl MHenry MElshahat M Ret al.

Desert farming benefits from microbial potential in arid soils and promotes diversity and plant health

[J].PLoS One,201169):1-9.

[本文引用: 3]

Li F RLiu J LRen Wet al.

Land-use change alters patterns of soil biodiversity in arid lands of northwestern China

[J].Plant and Soil,20184281/2):371-388.

[本文引用: 4]

李婷张威刘光琇.

荒漠土壤微生物群落结构特征研究进展

[J].中国沙漠,2018382):329-338.

[本文引用: 2]

Ling H BGuo BXu H Let al.

Configuration of water resources for a typical river basin in an arid region of China based on the ecological water requirements (EWRs) of desert riparian vegetation

[J].Global and Planetary Change,2014122292-304.

[本文引用: 1]

Jones D LWillett V B.

Experimental evaluation of methods to quantify dissolved organic nitrogen (DON) and dissolved organic carbon (DOC) in soil

[J].Soil Biology & Biochemistry,2006385):991-999.

[本文引用: 1]

牛百成赵成义冯广龙.

秸秆还田对绿洲棉田土壤CO2时空分布的影响

[J].干旱区研究,2017344):75-83.

[本文引用: 1]

王勇赵成义.

不同水肥条件对绿洲农田土壤N2O排放的影响

[J].干旱区研究,2018354):938-944.

[本文引用: 1]

Angel RPasternak ZSoares M I Met al.

Active and total prokaryotic communities in dryland soils

[J].Fems Microbiology Ecology,2013861):130-138.

[本文引用: 1]

Arenz B EBlanchette R A.

Distribution and abundance of soil fungi in Antarctica at sites on the Peninsula,Ross Sea Region and McMurdo Dry Valleys

[J].Soil Biology & Biochemistry,2011432):308-315.

[本文引用: 2]

Hu Y GZhang Z SHuang Let al.

Shifts in soil microbial community functional gene structure across a 61-year desert revegetation chronosequence

[J].Geoderma,2019347126-134.

[本文引用: 1]

Rath K MRousk J.

Salt effects on the soil microbial decomposer community and their role in organic carbon cycling:a review

[J].Soil Biology & Biochemistry,201581108-123.

[本文引用: 1]

Oren A.

Thermodynamic limits to microbial life at high salt concentrations

[J].Environmental Microbiology,2011138):1908-1923.

[本文引用: 1]

Lester E DSatomi MPonce A.

Microflora of extreme arid Atacama Desert soils

[J].Soil Biology & Biochemistry,2007392):704-708.

[本文引用: 1]

Chanal AChapon VBenzerara Ket al.

The desert of Tataouine:an extreme environment that hosts a wide diversity of microorganisms and radiotolerant bacteria

[J].Environmental Microbiology,200683):514-525.

[本文引用: 2]

Bhatnagar ABhatnagar M.

Microbial diversity in desert ecosystems

[J].Current Science,2005891):91-100.

[本文引用: 1]

An SCouteau CLuo Fet al.

Bacterial diversity of surface sand samples from the Gobi and Taklamaken Deserts

[J].Microbial Ecology,2013664):850-860.

[本文引用: 2]

Prestel ESalamitou SDubow M S.

An examination of the bacteriophages and bacteria of the Namib desert

[J].Journal of Microbiology,2008464):364-372.

[本文引用: 1]

Goncalves V NCantrell C LWedge D Eet al.

Fungi associated with rocks of the Atacama Desert:taxonomy,distribution,diversity,ecology and bioprospection for bioactive compounds

[J].Environmental Microbiology,2016181):232-245.

[本文引用: 1]

Grishkan INevo E.

Spatiotemporal distribution of soil microfungi in the Makhtesh Ramon area,central Negev Desert,Israel

[J].Fungal Ecology,201034):326-337.

贾美清黄静孟元.

内蒙古荒漠草原土壤可培养真菌的群落结构和空间分布分析

[J].草地学报,2017252):315-321.

[本文引用: 1]

Fierer NBradford M AJackson R B.

Toward an ecological classification of soil bacteria

[J].Ecology,2007886):1354-1364.

[本文引用: 1]

Ben-David E AZaady ESher Yet al.

Assessment of the spatial distribution of soil microbial communities in patchy arid and semi-arid landscapes of the Negev Desert using combined PLFA and DGGE analyses

[J].Fems Microbiology Ecology,2011763):492-503.

[本文引用: 1]

Frossard ARamond J-BSeely Met al.

Water regime history drives responses of soil Namib Desert microbial communities to wetting events

[J].Scientific Reports,201551):1-13.

[本文引用: 1]

/